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Murielle Mailloux est née le 10 août 1942, dans la paroisse de l'Immaculée-Conception, à Montréal, et a grandi à Ville Saint-Pierre (qui fait maintenant partie de l'arrondissement de Lachine). Elle est l'aînée de cinq filles et a également deux frères.

Au début des années 1960, elle s'implique dans l'Association des guides catholiques du Canada, qui depuis 1961, remplace la Fédération des guides catholiques de la Province de Québec (fondée en 1938 et affiliée à la Canadian Girl Guides Association). Elle y débute comme guide aînée, un titre habituellement conféré à toute fille âgée de plus de 17 ans. Elle y sera assistante cheftaine et commissaire. Elle participe à plusieurs camps avec la 47^e compagnie Lachine de la paroisse de Très-Saint-Sacrement. Elle est également commissaire dans la paroisse adjacente de Cœur-Immaculé-de-Marie (Côte-Saint-Paul).

Murielle Mailloux travaille d'abord comme secrétaire pour financer les études qu'elle entreprend, de 1963 à 1966, à l'École des infirmières de l'Hôpital Notre-Dame de l'Espérance (Saint-Laurent, Québec). Cette école, fondée en 1922 par les Sœurs de l'Espérance pour la formation d'infirmières religieuses, s'ouvre aux laïques en 1943.

Après l'obtention de son diplôme, elle exerce la profession d'infirmière dans plusieurs institutions du milieu médical québécois, dont l'Hôpital Saint-Luc de Montréal et l'Hôpital psychiatrique Saint-Jean-de-Dieu (actuel Institut universitaire en santé mentale de Montréal) dans l'est de la ville de Montréal.

Murielle Mailloux poursuit sa formation en réalisant un baccalauréat en sciences infirmières à l'Université de Montréal, à la fin des années 1960. Plus tard, elle obtient une maîtrise en administration publique à l'École nationale d'administration publique (1980). Au cours d'une carrière aussi remplie que diversifiée, elle œuvre entre autres à rétablir le plein fonctionnement d'un hôpital mis sous tutelle, dans la région de l'Outaouais. Elle s'implique au sein de l'Ordre des infirmières et infirmiers du Québec de 1977 à 1985, notamment comme présidente du Comité d'évaluation pédagogique et conseillère en formation. Elle contribue également à la réorganisation du service des examens d'admission à la profession, puis au développement de l'actualisation professionnelle. Au milieu des années 1980, elle participe à l'implantation du système 911 et ensuite du service Info-Santé de Montréal. Son travail lui vaut plusieurs reconnaissances professionnelles, dont le Grand prix Innovation clinique-Abbott décerné en 1996.

Au cours des années 1990, elle est responsable des soins infirmiers au CLSC de Montréal-Nord. En 1997, à l'âge de 55 ans, elle prend une retraite anticipée. Elle revient toutefois à la pratique des soins infirmiers quelques années plus tard, en travaillant au CHSLD de Vigi Santé à Pierrefonds, puis comme infirmière soignante et assistante infirmière-chef à l'infirmerie de la congrégation des Sœurs de Sainte-Anne à Lachine. Murielle Mailloux prend finalement sa retraite définitive en 2014, à l'âge de 71 ans.